第一代到第四代DNA测序的区别是什么？

坑已经填了一半了，才发现已经有大神总结过了，行文流畅，内容严谨，，，
瞬间感觉自己成渣了……
 
链接：http://www.stbioinf.com/2013/08/02/An-Introduction-of-NGS-Sequence.html
 
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以下为原答案（坑还没填完5555）
 有错请打脸，最好疼一点

第一代测序：
 
基于双脱氧链终止法的古老技术（当然准确性挺好，据说有一些公司还在用来测一些比较短的序列）
由Sanger（两块诺奖大神，第一次蛋白质的测序--胰岛素的51个氨基酸序列，和第一次DNA的测序都是他老人家做的，简直了！）发明，并广为流传（包括试卷上）
主要局限于不能测很长的（超过1000bp 的）DNA片段
（然后就让鸟枪法这一干翻六大科技大国的蜜汁技术出现了！）
主要缺点是---
 
1.太贵
就算是荧光标签代替了放射性标记，用毛细管电泳代替了普通平板电泳，再加上各种优化，但是，每一千个碱基对还是要0.5美元。
什么？你说不算很贵？
那请土豪君给自己用Sanger法测一次序，要知道人有大约有30亿个碱基对哦！
 
小学数学应用题第一题：
 
土豪君想要给自己的30亿个碱基对测序，
已知一千个碱基对0.5美元，
请问土豪君最少需要多少钱？
 
正确答案：一百五十万美元
 
淡然，这比人类基因组计划一个碱基对一美元已经便宜多了（某大国们哭晕在厕所里）
 
什么，你说你不差钱？
那你的时间够多么？（也就是下一个缺陷）
 
2.太慢
 
现在的Sanger 法测序可达到每机器每秒24个碱基，那么问题来了……
 
小学数学应用题第二题：
 
由于富豪们太多了，土豪君只抢到了一台测序仪，
已知这台机器每秒能读24个碱基对，
如果土豪君想要给自己的30亿个碱基对测序，
请问土豪君最少需要多少时间？
 
正确答案：1,446.75925926天=四年
 
如果土豪君是因为某些疾病急需知道自己的遗传信息
只能祝土豪君长寿了....
 
综上所述：
第一代测序技术的优势在于：
1.原理简单，入门低
2.普及率广 
3.比较靠谱（准确度高）
4.单次读长较长
 
缺陷也很明显：
1.价格高
2.通量低
 
对于第二代及其以后的技术，放一张福利图
 

图片来源：现代分子生物学 朱玉贤 第四版（以下部分图片来源相同，不再赘述）
（像素渣，见谅）
 
第二代测序
 
为了生命科学事业的发展（毕业论文早发表），
为了人类生活水平的提高（自己钱包鼓起来），
 
无数生命科学开拓者一往无前，加班加点，
在老板的辛勤领（ya)导（zha)下，
很快开发了第二代的测序技术，
其中最广为人知的就是454系统和Illumina公司的Solexa
（其实都差不多，不过据说454系统基本没人用了，而Illumina公司逐渐成了行业巨头，听说最近又有新测序仪推出来了）
 
相对于上一代测序技术，第二代测序技术的改进点在于
1.体外构建测序文库
2.体外扩增测序模版
3.高密度的矩阵化测序
 
简单来说 就是
1.把细胞干的事（生物学角度的），用最简单的生化反应完成（化学角度的）

因为第一代测序用的是细菌克隆培养扩增待测样本，但是细胞中不仅要进行DNA的合成，还有很多维持自身代谢所必需的生化反应，这就使得人们要花更多的钱买试剂。而二代测序的体外环节，相当于只发生了它想要的生化反应，因而部分降低了成本

2.把能同时干的事一块干 （平行化）

这个就相当于团购（雾），一方面降低成本，另一方面还大大加速了测序速度

3.机器能干的别让人干（自动化）

人嘛，
一方面总会疲劳，总会出错，
另一方面干活慢，无法量化 ，
最重要的是
，
，
，
居然还要领工资（尽管金额感人）
 
总而言之，与其让他们干活，还不如让他们去伺候机器老爷（大雾）
因而， 自动化的出现，大大加快了测序速度，提高了结果的准确性，降低了测序成本
 
而上述三者的前提离不开两种神奇的扩增方案，一种叫乳胶PCR（454平台） ，一种叫桥联PCR（Illumina公司）
 
福利图又来了

 
再来一张第一二代测序技术的流程对比图

 
 
 （坑已经填了一半了，改天回来再填）